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    BT24/6獨立式孢子安瓿

    發布時間: 2025-08-04  點擊次數: 557次

    獨立式孢子安瓿(適用于蒸汽滅菌,含 10^6 個孢子 / 0.6 毫升)
    庫存單位編碼:BT24/6
    類別:生物指示劑、獨立式
    標簽:獨立式 - 蒸汽、孢子安瓿

    描述

    BT24/6/獨立式孢子安瓿,用于液體的工業蒸汽低溫滅菌(110°C-121°C)。每支安瓿含枯草芽孢桿菌DSM 5230ATCC® 3502110^6個孢子。(規格7×40毫米)。含0.6毫升培養基。

     

    Bionova® BT24生物指示劑專為監測110-121°C的蒸汽滅菌過程而設計。

     

    如果滅菌過程失敗,在35-39°C下培養后,指示劑培養基會變為黃色,表明存在活的枯草芽孢桿菌孢子。

     

    如果滅菌過程有效,培養后指示劑培養基將保持原有顏色。最終讀數應在35-39°C下培養48小時后進行。

     

    使用說明

     

    1.  Bionova® BT24安瓿從冰箱中取出,在室溫下放置不超過10分鐘。

     

    2.  Bionova® BT24安瓿放入裝有待滅菌液體的容器中,或放入裝有與待滅菌液體相似液體的容器中。該容器的大小和容積應與裝有待滅菌液體的容器相同。

     

    3.  按常規進行滅菌。

     

    4.  滅菌過程完成后,打開滅菌器門,等待5分鐘,然后從容器中取出生物指示劑。警告:從滅菌容器中取出Bionova® BT24生物指示劑時,請佩戴安全眼鏡和手套。

     

    5.  將經過處理的生物指示劑、一個陰性對照和一個未滅菌的生物指示劑作為陽性對照,在35-39°C下培養48小時。

     

    陽性對照用于確保培養條件達標。

     

    陰性對照未經過滅菌處理,可作為參考顏色,用于比較陽性結果和陰性結果。相反,當在滅菌過程中與安瓿一起使用時,它可以確保滅菌后立即產生的任何顏色變化都是滅菌過程導致的,而非芽孢萌發和/或生長所致。

     

    應每隔10小時進行一次讀數。

     

    建議使用Bionova® IC10/20雙溫培養箱或其他類似設備,以確保有效的溫度控制。警告:傳統培養箱的熱分布曲線與上述推薦的培養箱不同,因此使用它們可能會影響或延遲Bionova® BT21生物指示劑的結果。

     

    經過處理的生物指示劑培養基變為黃色,表明滅菌過程失敗。

     

    如果48小時后,經過處理的指示劑沒有發生顏色變化,則獲得最終陰性結果,表明滅菌過程成功。為使結果有效,陽性對照指示劑應變為黃色,而陰性對照應保持原有顏色。 

     

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    腦鈉肽(BNP)及其前體蛋白的N端部分(NT - proBNP)、proBNP(前腦鈉肽)和BNP(腦鈉肽)

     

    腦鈉肽(BNP)及其前體蛋白的N端部分(NT - proBNP)已被確立為心力衰竭(HF)的診斷和預后生物標志物,心力衰竭是一個嚴重的臨床和公共衛生問題,其特點是患病率不斷上升,經濟負擔加重,據美國心臟協會稱,美國有650萬人患有心力衰竭,每年新增病例近100萬,全球范圍內,心力衰竭影響著2300多萬人。慢性腎臟疾病、高血壓和糖尿病是人群中心力衰竭的危險因素。此外,心力衰竭的患病率在65歲以上人群中更高。心力衰竭會導致顯著的發病率和死亡率。

     

    **作為診斷標志物的BNP、NT - proBNPproBNP**

    臨床指南建議檢測BNPNT - proBNP,以排除或確診疑似急性心力衰竭患者。這些標志物也可用于監測疾病的進展。BNPNT - proBNP的臨床價值相似(2 - 3),目前這些生物標志物在臨床實踐中被使用。

    在健康成年人中,血漿中BNP的上限為35 pg/mlNT - proBNP125 pg/ml4)。然而,這些數值取決于年齡和性別,在老年人和女性中數值更高。

    這些分析物的濃度與疾病的嚴重程度相關,可用于對數百種心力衰竭的原因和護理進行分類。據報道,在心力衰竭非常早期的無癥狀患者中,這兩種肽的濃度已經升高,根據紐約心臟協會(NYHA)分級,NYHA I級(心功能I級)時就已升高,尤其是NYHA IV級(心功能IV級)時,BNPNT - proBNP的血濃度會顯著升高。因此,人類血液中肽的濃度被廣泛用于人群中心力衰竭患者的評估以及評估疾病的嚴重程度。

    確定BNPNT - proBNP濃度對于不同心臟疾病患者的風險分層也很有用。未來會出現并發癥的患者,其BNPNT - proBNP濃度明顯高于無并發癥的患者。在充血性心力衰竭患者中,高BNPNT - proBNP水平可預測死亡,與心血管風險相關。同時,在急性冠狀動脈綜合征患者中,這兩種肽的水平升高可預測死亡率和嚴重心力衰竭。

    除了NT - proBNPBNP,它們的前體proBNP - 108也在心力衰竭患者的血液中大量存在。僅檢測proBNP的檢測方法可能具有更高的分析特異性。

     

    **臨床應用**

    - 心力衰竭的確診或排除

    - 心力衰竭嚴重程度的評估

    - 疾病發展的預測

    - 監測藥物治療中藥物的存在情況

    proBNP及其衍生物的生物化學特性

    編碼腦鈉肽(BNP)的基因在心肌細胞中被激活,以響應因壓力或容量過載導致的心肌拉伸。這會促使合成一個含134個氨基酸殘基(aa.)的長細胞內前體肽原——前腦鈉肽原(preproBNP)。在信號肽被移除后,對該前體肽進行進一步加工,會釋放出具有生物活性的BNPaa.77 - 108)和N端前腦鈉肽(NT - proBNP,aa.1 - 76) 。此外,未加工的proBNPaa.25 - 108)以及proBNP的其他衍生物,如NproBNP - 108aa.1 - 108),也會被分泌到血液中并在人體血液中循環(見圖1)。BNP能迅速從循環中被清除,其半衰期約為20分鐘。而NT - proBNP的半衰期更長,約為60 - 120分鐘,這也解釋了血液中NT - proBNP濃度相對更高的現象。

    前腦鈉肽原是一種糖基化蛋白,已確定有七個糖基化位點(3)。所有這些糖基化位點都位于NT - proBNP部分,而BNP則未發生糖基化。

    我們之前的研究表明,其中一個氨基酸位點(T71)的糖基化狀態,對proBNP加工成BNPNT - proBNP的過程至關重要。T71靠近proBNP的切割位點,且依賴于收縮的切割過程只有在T71未被糖基化時才會發生。循環中存在的未加工proBNP,其T71位點發生了O - 糖基化,而NproBNP - N中的相同氨基酸位點則未被糖基化(3)。

     

    免疫分析開發用試劑

    近幾 年 來,我 們 一 直 在 研 究proBNP及其衍生物,還在同行評審期刊上發表了數篇文章(如需了解更多細節,見第10 - 11頁)。我們提供種類豐富、經過充分鑒定的單克隆抗體(mAbs),可用于開發靈敏且穩定的免疫分析方法,以檢測臨床樣本中的proBNP、NproBNPBNP。

    我們還提供不同的重組抗原,可作為免疫分析中的標準品和校準品 。

     

    1proBNP加工過程示意圖。前腦鈉肽原(preproBNP)在翻譯及信號肽切割后形成proBNP。proBNP在多個位點發生糖基化。只有T71位點未被糖基化的proBNP,才會被有效地加工成具有生物活性的BNPaa.77 - 108)和NproBNPaa.1 - 76)。未被有效加工的proBNP會作為未加工的proBNPaa.25 - 108)以及NproBNP - 108aa.1 - 108)分泌到血液中。NproBNP、未加工的proBNPNproBNPBNP會被釋放到血液中 。

    ### 腦鈉肽檢測方法開發

    人類腦鈉肽(BNP)是一種分子量為3.5 kDa的肽,由前腦鈉肽原(proBNP)的C端切割形成。N端腦鈉肽前體(NT - proBNP,即前腦鈉肽原的N端部分,包含氨基酸1 - 76)的分子量為8.5 kDa。BNP肽的氨基酸序列通常編號為1 - 32,而BNP - 32的氨基酸1 - 10會被切割,形成BNP - 22(見圖1) 。

    BNP是一種利鈉肽(9),它與利鈉肽家族的A、BC型受體結合。利鈉肽是一類肽類激素,包括心房利鈉肽(ANP)、腦鈉肽(BNP)、C型利鈉肽(CNP)、樹眼鏡蛇屬利鈉肽(DNP)和尿舒張素。BNP是一種由32個氨基酸組成的肽,含有一個由6個半胱氨酸殘基形成的二硫鍵,在分子的兩個末端之間形成一個環狀結構。這種環狀結構在不同的利鈉肽之間高度同源,是這些肽的共同特征。在第7位氨基酸殘基之后,利鈉肽的環狀結構與線性N端和C端區域相連(見圖2) 。

     

    #### 腦鈉肽的多種分子形式

    已知BNP在血漿中以多種形式存在(10 - 11)。多項研究揭示,心力衰竭(HF)患者血漿中的BNP會從N端和C端被截斷 。

    只有小部分BNP以完整的BNP - 32分子形式循環(12)。像二肽基肽酶IVDPP IV)和中性內肽酶(腦啡肽酶,NEP)這類蛋白酶會切割BNP,使其降解為BNP - 23BNP - 245,13 - 14)。已知BNP還會被降解為更小的片段,如BNP - 1 - 16、BNP - 3 - 32等。BNP的兩種主要蛋白水解降解形式總結于圖2 。

     

    #### 血液中腦鈉肽的免疫反應性形式

    BNP免疫反應性(IR)形式包括BNP - 32(完整形式,見圖3)以及被截斷的形式,如BNP - 23BNP - 24。這些被截斷的形式,即IR - BNP,會被針對BNP不同表位的抗體識別。無論是完整的還是被截斷的BNP形式,都會被識別BNP線性表位的抗體檢測到。我們利用凝膠過濾法分析了心力衰竭患者血漿中的這些分子,通過測量每個級分的BNP免疫反應性,確定了BNP免疫反應性的主要形式。圖3展示了一個具有高度代表性的凝膠過濾圖譜。結果顯示,只有兩個明顯的峰含有BNP免疫反應性。第一個峰代表完整的proBNP/BNP形式;第二個峰更小,代表BNP片段(見圖3)。我們之前的研究表明,血漿中主要的BNP免疫反應性形式是未加工的proBNP11) 。

     

    #### 傳統雙抗體夾心免疫檢測

    我們提供了針對不同BNP分子(見圖4)的單克隆抗體(MAbs)。幾種不同單克隆抗體的組合可開發出高度特異、靈敏且在人血中具有穩健反應性的免疫檢測方法。表1列出了推薦用于傳統雙抗體夾心免疫檢測的抗體組合。這些推薦的抗體組合已在免疫分析平臺上得到驗證 。

     

    (以下為圖、表等內容翻譯,因部分圖注等表述專業且為輔助理解,盡量貼近原意)

    - **2**:人BNP schematic representation(示意性展示 )及兩種酶解切割位點。圖中,NT - proBNP N端腦鈉肽前體,腦啡肽酶(NEP)是一種解肽酶 。

    - **3**: 對充血性proBNPBNP進行凝膠過濾研究。來自一名代表性心力衰竭患者的血漿,經SP - Sepharose(一種離子交換介質 )預分離后,上樣到凝膠過濾柱(Superdex Peptide HR 10/30 )。圖中兩個峰,第一個峰對應proBNP,第二個峰對應BNP形式 。

    - **4**:抗BNP抗體的表位映射 。

    - **1**:用于傳統雙抗體夾心免疫檢測的推薦單克隆抗體對。“Capture"為捕獲抗體,“Detection"為檢測抗體?!?span>Data included in this document are based on immunocapture fluorescence immunoassay platforms"(本文件中的數據基于免疫捕獲熒光免疫分析平臺 ) ,即文中數據是依托該免疫分析平臺得出,用于說明推薦抗體組合在相應檢測體系里的應用依據 。

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